制備大腸桿菌菌懸液的步驟是什么？
發(fā)布時間：2019-06-13 07:50
編輯：創(chuàng)大鋼鐵
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先把菌液稀釋一定濃度后再用細胞計數板來確定菌濃度實驗原理：當待測細胞懸液中細胞均勻分布時，通過測定一定體積懸液中的細胞的
先把菌液稀釋一定濃度后再用細胞計數板來確定菌濃度實驗原理：當待測細胞懸液中細胞均勻分布時，通過測定一定體積懸液中的細胞的數目，即可換算出每毫升細胞懸液中細胞的細胞數目。具體操作：1. 將計數板及蓋片擦拭干凈，并將蓋片蓋在計數板。2. 將細胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計數板之間，靜置3min，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中。3. 計算板四大格細胞總數，壓線細胞只計左側和上方的。然后按公式計算：細胞數/mL=四大格細胞總數/4×104說明：公式中除以4，因為計數了4個大格的細胞數。公式中乘以104因為計數板中每一個大格的體積為：1.0mm（長）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）=0.1mm3 而 1ml=1000mm3（注意：鏡下偶見有兩個以上細胞組成的細胞團，應按單個細胞計算，若細胞團10%以上，說明分散不好，需重新制備細胞懸液）
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